摘 要：目的：比較兩種品牌采血管對6種精神科藥物(阿立哌唑、脫氫阿立哌唑、艾司西酞普蘭、奧氮平、喹硫平及度洛西汀)的血藥濃度測定結果。方法：在門診患者中隨機選取做不同藥物濃度檢測的患者，清晨未服藥狀態下用兩種品牌含分離膠及促凝劑的采血管采集靜脈血，每種藥品采集8例，采用高效液相色譜-質譜聯用法進行血藥濃度測定。結果：兩種采血管檢測阿立哌唑、脫氫阿立哌唑及喹硫平的血藥濃度測定值比較，差異有統計學意義(P<0.05)；檢測艾司西酞普蘭、奧氮平及度洛西汀的血藥濃度比較，差異無統計學意義(P>0.05)。結論：兩種品牌采血管對不同藥物的血藥濃度測定結果存在影響，建議在進行藥物濃度檢測前做好采血管比對分析，選取適宜的采血管。
關鍵詞：采血管 血藥濃度 測定結果影響
阿立哌唑及其代謝物脫氫阿立哌唑、艾司西酞普蘭、奧氮平、喹硫平及度洛西汀是臨床上常用的6種精神科治療藥物。一般精神科藥物都需要長期服用，患者的服藥依存性差，其藥動學上的個體差異明顯，同時血藥濃度與療效和不良反應密切相關[1-2]。因此，準確檢測患者體內的藥物濃度，并調整血藥濃度在治療參考范圍內，對于患者的診療和康復是必要的。高效液相色譜-質譜聯用儀是將液相色譜儀與質譜儀通過一定接口耦合到一起的分析儀器。樣品通過液相色譜儀分離后的各個組分依次進入質譜檢測器進行檢測。通過對質譜圖的分析處理，得到樣品的定性、定量結果。液質聯用法檢測血藥濃度主要是通過分析血漿或血清中的相關化合物的分子離子峰進行準確定量。但是，不同品牌的采血管可能會加入不同的物質，會出現影響化合物定量檢測的問題。本文主要對兩種不同品牌采血管的6種血藥濃度檢測是否存在差異性進行了研究，現報告如下。
資料與方法
儀器與試劑：采血管A(5 m L分離膠+促凝劑管)；采血管B(5 m L分離膠+促凝劑管)；高速冷凍離心機(型號3H16R1)；高效液相色譜-質譜聯用(型號TQS)；旋渦混合器(型號Vortex-Genie 2)；高端超純水系統(型號ALH-6000-U)，標準曲線及質控品均為杭州某醫療器械有限公司提供。
色譜條件：色譜柱為ACQUITY UPLC C18柱(2.1×50 mm,1.7μm)，柱溫為50℃，流動相為0.1%的甲酸甲醇和0.1%甲酸水，按梯度程序洗脫，流速為0.5 m L/min，進樣量2μL。
質譜條件：電噴霧離子源(ESI)(+)為3.00 k V，毛細管溫度500℃，離子傳輸管溫度為150℃，鞘氣流速為150 L/hr，輔助氣流速為0.15 m L/min，掃描模式為Full MS，采集質量范圍為150.0～500.0 m/z。
標本采集：患者均為前日夜間服用最后1次藥，至清晨采血時間隔8～10 h，且采血前未飲食。給患者扎上止血帶，對穿刺部位的皮膚進行常規消毒，待消毒液干燥后對患者進行靜脈穿刺，插上負壓采血管之后立即解開止血帶，血液會利用壓差的原理自動流進負壓管當中，達到需要量之后血液會停止變化。受試者使用A采血管和B采血管各采1管血。采集完成后退出試管，輕輕顛倒混勻6～8次，讓血液和抗凝劑達到充分混合的狀態。采集到標本之后放置15 min待血液凝固，按要求離心后送到質譜室進行樣品前處理。
樣品前處理：吸取100μL血清于1.5 m L離心管中，加入400μL的內標溶液，渦旋混勻5 min,4℃15 000 r/min離心10 min。吸取上清液300μL,4℃15 000 r/min離心10 min。再吸取上清液100μL加入96孔板中，即得待測樣品。
統計學方法：數據用Microsoft Excel2007軟件進行統計分析，計量資料用(±s)表示，各管間進行一致性比較，采用直線相關與回歸分析，對統計參數直線相關與回歸系數(r)、總體截距(a)與總體斜率(b)進行t檢驗分析，P<0.05為差異有統計學意義。
結果
按照上述檢測方法進行數據處理及分析：8例患者兩種采血管的檢測結果顯示，A、B兩種采血管測定結果阿立哌唑、脫氫阿立哌唑及喹硫平有極顯著性差異，差異有統計學意義(P<0.01)；艾司西酞普蘭、奧氮平及度洛西汀比較，差異無統計學意義(P>0.05)。
討論
能正確采集及處理標本，是整個實驗過程質量控制當中最重要的環節，采集血液標本、分離血清，在臨床檢測分析中尤為必要[3-4]。目前分離膠試管已經廣泛應用到臨床生化、免疫、藥物濃度分析項目的測定中。肝素鋰抗凝管能快速分離血漿，能用在急診生化檢驗中，而分離膠試管當中的膠體本身和促凝劑，肝素鋰抗凝管中的肝素鋰是否會對檢測結果造成影響，還需要進一步觀察與驗證[5]。對于不同種類的采血管是否會影響到生化檢測結果，目前已有部分文獻進行了研究，血漿中視黃醇結合蛋白、前白蛋白、β2-微球蛋白、同型半胱氨酸、游離脂肪酸以及肌酸激酶等項目在生化分析儀上有了更多的應用，然而采血管對于這些項目的影響則較少[6-7]。
采集和分離血液標本，在臨床化學檢驗當中發揮了重要的作用。就當前臨床實踐情況來看，各種商品化的采血管已經廣泛應用于臨床當中[8-11]。從類型上來看，分離膠采血管的優點體現在分離血清速度快、容易保存等；肝素鋰抗凝管通常應用到急診生化檢驗當中，能及時分離開血漿，在常規急診生化項目檢測中應用普遍[12-14]。由于不同品牌以及不同類型的采血管當中添加的促凝劑、分離膠和抗凝劑都有很大的差異化，因此在臨床生化檢測中都會產生影響。不同品牌的采血管可能會加入不同的物質，會出現影響化合物定量檢測的問題。當前有很多文獻都分析了采血管對生化項目及免疫項目檢測的影響[15-17]，然而對血藥濃度方面的研究則較少。
不同抗凝劑的添加工藝都會對檢測結果造成影響，而一般在抗凝真空采血管的添加物中，除了EDTA-K2之外，還會再加入一些添加劑涂在采血管的內壁當中，防止血液在采集過程中掛壁的情況，方便讓血液更加通暢流入到采血管中，減少溶血。然而在最近幾年的研究中發現，添加表面活性劑之后，常常會對檢驗結果產生影響。
本研究發現，在相同實驗條件下，A、B兩種采血管對艾司西酞普蘭、奧氮平及度洛西汀藥物濃度檢測比較，差異無統計學意義(P>0.05)；對阿立哌唑、脫氫阿立哌唑及喹硫平的血藥濃度水平檢測比較，差異有統計學意義(P<0.01)；這可能是由于兩種采血管中添加的分離膠或促凝膠成分不同所致。A管為本實驗室質譜方法學開發單位推薦用管，日常的室內質控較穩定，參加室間質評成績均合格。通過與臨床溝通，結合《AGNP精神科治療藥物監測共識指南(2011版)》中“劑量相關參考濃度范圍”，A管的檢驗結果與臨床用藥量更相符，本實驗室確認選擇結果準確性更高的A管。
綜上討論，在實際臨床檢測中，要注意到檢測項目的定標以及室內質控要求外，還要按照美國病理家學會的要求，比對好真空采血管的質量和適應性，建議實驗室在采用液相色譜-質譜法進行血藥濃度檢測前，需對所使用的采血管進行驗證，保障所選擇的真空采血管完全合適，以保證檢測結果的準確性。
參考文獻
[1]陳晨,董倩楠,王琳,等.液相色譜-串聯質譜法同時測定人血漿中奧美拉唑及其代謝物奧美拉唑砜的質量濃度[J].沈陽藥科大學學報,2020,37(6):518-526.
[2]胡雪巖,程丹丹,侯媛媛,等.基于UPLC-Q/TOF-MS技術的治咳川貝枇杷滴丸在家兔體內的定性定量研究[J].藥物評價研究,2019,42(1):103-108.
[3]李莎,伍洋科,顏笑,等.應用Westgard多規則理論評估萬古霉素血藥濃度監測的室內質控[J].中國醫院藥學雜志,2018,38(23):2425-2428.
[4]褚利娟,甘慧,高月,等.LC-MS/MS法測定人血漿中抗輻射新藥E0703和代謝物E0703-tone的質量濃度及藥動學研究[J].沈陽藥科大學學報,2018,35(9):763-768.
[5]秦小江,侯曉敏,張坤,等.血液中6種苯系物吹掃捕集/氣相色譜/同位素內標質譜串聯法測定[J].中國公共衛生,2018,34(6):926-929.
[6]張曉旭,侯林中,姜暉,等.新型冠狀病毒滅活方式對高效液相色譜法監測萬古霉素血藥濃度的影響[J].中國藥業,2020,29(9):27-29.
[7]趙博欣,劉思佳,劉媛,等.血液標本滅活處理對液相串聯質譜法伏立康唑治療藥物監測的影響及其在COVID-19疫情期間的應用[J].南方醫科大學學報,2020,40(3):342-345.
[8]周嚴嚴,顧欣如,李濤,等.蒲地藍消炎口服液活性成分在大鼠體內的藥代動力學過程及對肝臟藥物代謝酶的影響[J].中國中藥雜志,2019,44(22):4932-4939.
[9]吳妍,張哲弢,史天陸,等.PCI術后患者PON1-126C>G基因多態性對氯吡格雷所致出血事件的影響研究[J].中國醫院藥學雜志,2018,38(11):1187-1191.
[10]龍子君,劉慶,李蘇,等.納米增強免疫比濁法和高效液相色譜法檢測化療患者5-氟尿嘧啶血藥濃度的比較[J].江蘇醫藥,2017,43(18):1306-1310.
[11]趙婷,于靜,王婷婷,等.新疆癲癇患兒左乙拉西坦穩態血藥濃度影響因素探討及參考區間的初步建立研究[J].中國臨床藥理學雜志,2020,36(10):1208-1211.
[12]吳菁,高申苗.伏立康唑血藥濃度監測對侵襲性肺部真菌感染患者的影響[J].河南醫學研究,2020,29(14):2586-2588.
[13]師亞玲,方志遠,李茁,等.萬古霉素首次監測與個體化給藥后血藥濃度未達標的影響因素分析[J].中國藥師,2020,23(2):307-310.
[14]陳宏鎮,謝煥山,陳超端,等.基于治療藥物監測的丙戊酸鈉緩釋片血藥濃度影響因素分析[J].中國臨床藥理學雜志,2020,36(10):1216-1219.
[15]薛盛敏,陸灝迪,唐蓮,等.群體藥代動力學軟件對萬古霉素穩態谷濃度的預測能力分析[J].中華危重病急救醫學,2020,32(1):50-55.
[16]魏菁菁,王冬梅,胡俊,等.腎移植術后患者血液他克莫司代謝率(C0/D值)對肝腎功能的影響研究[J].現代檢驗醫學雜志,2020,35(3):112-115.
[17]張文龍,姜美婷,劉艷,等.冠心寧注射液對大鼠體內華法林抗凝作用的影響及機制[J].實用藥物與臨床,2020,23(7):577-583.
